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基于成熟的STR-PCR扩增检测技术,涵盖了目前所有常见的核心基因座,包括新旧CODIS规定的全部基因座、欧洲标准(ESS)的STR基因座以及国内外主流试剂盒的绝大多数基因座,研究开发出的检测多重短串联重复序列(STR)的鉴定系统

Goldeneye®DNA身份鉴定系统38Y
Goldeneye®DNA身份鉴定系统38Y试剂盒,采用6色荧光标记技术,可同时检测包括公安部20个Y-STR核心基因座和15个优选基因座在内的共38个Y-STR基因座,并含有3个Y-indel位点和2个内质控位点,具有良好的数据比对兼容性。  ·20个核心基因座扩增片段长度均小于350bp,15个优选基因座扩增片段长度均小于500bp,并含有10个扩增片段小于220bp的Mini-STR基因座,利于高度降解等疑难检材的分型和比对·含有三个对于中国人群接近于零突变的Y-indel位点,更利于男性家系排查的快速比对·PCR扩增时间小于90分钟,快速高效·含有IPC60和IPC500两个内质控,用于监测PCR反应扩增效能和样品质量·可对血卡、唾液卡、血滤纸、FTA卡、棉棒等多种检材进行直接扩增而无需提取纯化,也可对提取模板DNA进行扩增检测
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Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A
Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A,采用五色荧光标记技术,单管同时扩增19个STR基因座和1个性别基因座,在涵盖13个CODIS核心基因座的同时,满足公安部对常染色体STR试剂盒要求的20个核心基因座,是法医DNA数据库建设及司法亲缘鉴定的得力助手。   Ø与公安部要求的20个核心基因座完全一致,具有良好的数据比对兼容性Ø累积非父排除率高于0.9999999,累积个人识别力高于0.999999999999999999,符合司法鉴定单亲鉴定的要求以及《生物学全同胞关系鉴定实施规范》中要求必检的19个STR基因座ØPCR扩增时间缩短至90分钟以内,大大提高了检测的效率Ø能够对包括FTA卡在内的多种血痕或唾液斑检材进行直接扩增,而无需提取纯化,并且具有极高的样本检出率
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Goldeneye®DNA身份鉴定系统25A
Goldeneye®DNA身份鉴定系统25A采用六色荧光标记技术,可同时扩增检测26个基因座,包含23个常染色体STR基因座、性别基因座Amelogenin、1个Y-STR基因座和1个Yindel基因座,具有更高的个体识别力、非父排除率和数据比对兼容性,可广泛应用于案件侦破、数据库建设、亲缘鉴定等。   Ø兼容性好涵盖了新版CODIS推荐基因座和公安部要求的20个核心基因座Ø识别力强更多的基因座,更高的个体识别能力Ø适应性好适应于样本提取模板DNA扩增,也可对包括FTA卡在内的多种载体血痕或唾液斑样本进行直接扩增,成功率高Ø快速高效PCR反应时间最短仅需60分钟Ø适用降解检材最大扩增片段长度小于420bp,并含有10个扩增长度小于220bp的Mini-STR基因座,利于高度降解等疑难检材的分型和比对
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关于我们

       基点认知技术(北京)有限公司,成立于2006年6月,十余年来,专注于DNA检测技术,集产品的研发、生产、销售、技术服务为一体,在“见微知著,去伪存真”的理念下,推出了一系列Goldeneye® DNA身份鉴定系统产品,广泛应用于我国公安、司法和科研领域,尤其为我国DNA数据库建设做出巨大贡献,荣获多项公安部科技进步奖项,是一家走在DNA检测技术前沿的高新生物技术企业。

专业的技术服务体系

基点认知自成立以来,充分意识到面向用户的技术服务已经成为产品应用中非常重要的环节,技术服务是客户与基点认知之间的桥梁。

产品优势

快速的服务响应

基点认知除北京总部外已在全国各地建立了20余个办事处、服务网点以及联合实验室

产品优势

专业的技术服务团队

基点认知拥有一流的技术服务团队,总计70余位技术服务工程师,全部具有本科及以上生物学或法医学相关专业学历

产品优势

丰富的数据库建设经验

基点认知是全国最早为客户提供DNA数据库建设一体化服务的厂家

新闻中心

提供各种高品质的产品,同时也为客户提供技术支持和服务

	 五色荧光标记20个基因座复合扩增体系及法医学应用

五色荧光标记20个基因座复合扩增体系及法医学应用

2015-10-20
五色荧光标记20个基因座复合扩增体系及法医学应用姜先华1,贾菲1,赵金玲1,沈红缨1,陈初光2,金萍2,郭飞3,李秋阳1,邵武1,于蛟1(1.辽宁省刑事科学技术研究所,辽宁沈阳110032;2.基点认知技术(北京)有限公司,北京100190;3.中国医科大学法医学院,辽宁沈阳110002)【摘要】目的建立20个基因座五色荧光标记复合扩增检测体系,并评价其法医学应用价值。方法收集368份无关人血样及55份实际案例样本(包括血斑、体液斑、组织及毛发),采用五色荧光素标记技术,对Amelogenin和19个STR基因座(D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S1179、TPOX、PentaE、TH01、D12S391、D2S1338和FGA)进行基因型检测,并考察方法的一致性、灵敏度、种属特异性及检材适用性。结果本文五色荧光标记复合扩增检测体系可对所选20个基因座分型,结果稳定准确,且均衡性良好、无杂峰;群体调查显示累积个人识别率和累积非父排除率分别是0.999999999999999999999和0.99999999;灵敏度达125pg,种属特异性高,实际案例检材分型成功率高。结论本文五色荧光标记复合扩增检测体系各项指标可达到当前商品化试剂盒的检测水平,具有重要的法医学应用价值。【关键词】法医物证学;五色荧光标记;复合PCR;20个基因座;法医DNA分型【中图分类号】DF795.2【文献标识码】A【文章编号】1001-5728(2012)03-0185-05Developmentofa20-locusSTRfluorescent-multiplexPCRforforensicpurposes(JiangXianhua1,JiaFei1,ZhaoJinling1,ShenHongying1,ChenChuguang2,JinPing2,GuoFei3,LiQiuyang1,ShaoWu1,YuJiao1/1.LiaoningCriminalScienceandTechnologyInstitute,Shenyang110032,China;2.PeoplespotInc.,Beijing100190,China;3.ChinaMedicalUniversitySchoolofForensicMedicine,Shenyang110002,China)【Abstract】ObjectiveToconstructa20-locusSTRfluorescent-multiplexPCRforforensicpurposes.Methods368unrelatedindividualbloodsamplesand55routinecasesamples(includingbloodstains,bodyfluidstains,tissues,andhairs)werecollected.Amelogeninand19STRloci(D19S433,D5S818,D21S11,D18S51,D6S1043,D3S1358,D13S317,D7S820,D16S539,CSF1PO,PentaD,vWA,D8S1179,TPOX,PentaE,TH01,D12S391,D2S1338andFGA)wereusedtoconstructa20-plexPCRsystemusingafivecolorfluorescencelabelingtechnique,andthentheconsistency,sensitivity,species-specificityandbiologicalsamplesapplicabilitywereevaluated.ResultsThe20-locusSTRfluorescent-multiplexPCRsystemwasofwellaccuracy,stabilityandbalance,whichshowedrichgeneticinformation(thecumulativediscriminationpowerandcumulativechanceofexclusionreachedto0.999999999999999999999and0.99999999respectively),highsensitivity(125pg),highspecies-specificityandhighgenotypingsuccessrateforroutinebiologicalsamples.ConclusionTheperformanceofthis20-locusSTRfluorescent-multiplexPCRsystemcanwinthatofthecurrentcommercialkits,andithasimportantapplicationvalueinforensicscience.【Keywords】forensicbiologicalevidence;fivecoloredfluorescently-labeled;PCRmultiplex;20loci;forensicDNAtyping多色荧光STR复合扩增技术具有高效、灵敏、稳定等优点,在法医DNA分析广泛采用[1]。目前常用的16个基因座检测方法中,AmpFISTRIdentifilerTM、SinofilerTM(美国AB公司)为五色荧光标记,PowerPlex16(美国Promega公司)和GoldeneyeTM16A、16BT、16C(中国基点认知公司)均为四色荧光标记[2]。五色荧光比四色荧光标记技术容纳更多的基因座,可增加一次检验基因座的数量,提高数据库应·185·中国法医学杂志CHINJFORENSICMED2012年第27卷第3期用效率和个人识别能力,并可与目前普遍使用的毛细管电泳检测仪器相适应。本文采用五色荧光复合扩增技术对20个基因座进行检测,并考察该体系各项技术指标,为法庭科学DNA分析提供一种新方法。1材料与方法1.1样品用于方法考察及群体遗传学分析的无关个体血痕样本368份;用于法医学应用研究的已知个体来源的案件检材55份,包括10份血斑、10份精液/女性阴道液混合斑、10份汗液斑、10份唾液斑、5份肋软骨、5份肌肉组织和5份毛发;均为本实验室2000-2010年采集或检案积累。用于特异性检验的猪、鸡、鱼样品购于本市农贸市场。1.2复合扩增体系的建立1.2.1基因座的选择为获得更多信息量,提高非父排除率和个人识别力,本文依照《我国法庭科学DNA数据库选用的基因座》(GA469-2004)标准,并兼容当前DNA身份鉴定常用试剂盒的全部STR基因座的原则,选定了20个基因座,相关信息见表1。表120个基因座的相关信息Table1Relatedinformationof20STRLoci基因座染色体定位等位基因范围PCR产物长度/bp荧光标记物D19S43319q12~13.19~17.291~127FAMD5S8185q21~317~15142~175FAMD21S1121q21.124~38198~256FAMD18S5118q21.38~27283~357FAMD6S10436q16.19~21.3376~428FAMD3S13583p2112~20123~156HEXD13S31713q22~317~15171~204HEXD7S8207q11.21~226~14212~245HEXD16S53916q22~245~15260~301HEXCSF1PO5q33.3~346~15319~354HEXPentaD21q22.32.2~17369~441HEXAmelXp22.1~22.3,YX/Y106/112TMRvWA12p12~pter10~22124~172TMRD8S11798q24.1~24.27~18203~248TMRTPOX2p23~2pter7~13274~299TMRPentaE15q26.25~26322~423TMRTH0111p15~15.54~13.394~134ROXD12S39112p13.214~27145~197ROXD2S13382q35~37.115~28215~268ROXFGA4q2816~46.2278~402ROX1.2.2引物的设计和合成引物设计原则为:20~30bp之间,各基因座引物Tm值尽量一致;PCR产物片段长度在450bp以内。引物经HPLC检测分析,纯度大于99%。依据荧光素光谱特性、检测灵敏度等对常用的荧光标记物进行比较,选出彼此干扰最小的5种荧光素组合标记引物(表1)。1.2.3复合扩增体系的建立和优化建立20个基因座的复合扩增体系,并进行调整、优化实验[3-6]:引物浓度设置梯度(0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35μmol/L)。引物退火温度设置梯度(56、57、58、59、60、61、62℃)。缓冲液浓度设置梯度(0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35μmol/L)。模板浓度以9947A标准品DNA(10ng/μL)为模板,设置梯度(0.25、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、2.0、2.5ng)。PCR循环次数在以上确定的最佳引物浓度、退火温度、缓冲液浓度、DNA浓度条件下,设置PCR循环次数梯度(27、28、29、30、31、32)。1.2.4PCR产物的检测采用ABI3130XL型遗传分析仪及GeneMapper3.2软件对PCR产物进行检测和分型。编制与复合扩增体系中的基因座相对应Panel和与等位基因数据项对应Bin,导入GeneMapper3.2软件用于分析判型。1.3扩增体系指标验证及法医学应用1.3.1扩增体系技术指标验证一致性368份无关个体血样采用TECAN工作站磁珠法提取DNA,STR分型结果与SinofilerTM和PowerPlex16分型结果进行一致性和成功率比较。灵敏度采用美国Promega公司的9947ADNA(10ng/μL)进行灵敏度检测。模板定量为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625ng进行检测,平行重复3次。种属特异性设置人源性和非人源性检材(猪、鸡、鱼),测试方法的种属特异性。1.3.2案件检材应用血斑、混合斑、汗液斑、唾液斑、肋软骨、肌肉组织和毛发样本,经Chelex100法提取DNA,采用本文方法检测,与SinofilerTM和PowerPlex16分型结果比对。2结果与讨论2.1检测方法及遗传学调查本文最终选择的五色荧光复合扩增总体系·186·中国法医学杂志CHINJFORENSICMED2012年第27卷第3期10μL,内含:模板DNA0.5ng、2.5×PCR缓冲液4μL、5×引物混合物2μL、GoldTaq1U0.2μL。PCR循环参数为:95℃5min;94℃30s、60℃1min、70℃1min,共30次循环;最后60℃延伸30min。电泳检测:取1μLPCR产物、8.5μL去离子甲酰胺、0.5μLORANGE500分子量内标,混匀,95℃变性3min,立即冰浴;使用ABI3130XL型遗传分析仪电泳分离,毛细管36cm,“DyeSet”选择“E5”。采用GeneMapperIDv3.2软件进行分析。结果表明,本方法可对所选20个基因座成功分型,且均衡性良好,峰型对称尖锐、无双肩峰等杂峰。应用本文方法对368份无关个体血痕样本进行检测,19个STR基因座数据采用直接计数法和PowerStatsV12软件(http://www.promega.com)进行遗传学统计分析。结果表明:各基因座基因型观察值和期望值之间无显著差异,均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。19个STR基因座的等位基因及其频率以及相关遗传学参数见表2、3。表2
“DNA之父”提出颠覆性糖尿病新理论

“DNA之父”提出颠覆性糖尿病新理论

2019-09-16
DNA双螺旋结构的发现者,诺贝尔生理学或医学奖得主 James Watson 日前在著名医学杂志《柳叶刀》(The Lancet)上提出了2型糖尿病发病机制的新假说。Watson指出,糖尿病、痴呆、心血管疾病和一些癌症都与生物学氧化剂(活性氧 ROS )生成不足的有关。他还强调,更好的理解体育锻炼的作用,可以帮助人们治疗上述疾病。Watson 表示:“如今人们普遍认为 2 型糖尿病的发病原因是细胞内氧化反应过度引起炎症,从而杀死了胰腺组织中的细胞。”众所周知,这些细胞的正常功能对于正常血糖水平的维持很关键。    最近几年, Watson 在一些医学和分子生物学文献的基础上,经过反复推敲形成了另一个截然不同的观点。他强调自己并不是一个医生,而是一个科学学者。2 型糖尿病患者的胰腺组织中确实出现了发炎,这一点他并没有提出质疑。不过,他通过新理论解释了这一现象的原因。Watson 表示:“我认为,根本原因在于生物学氧化剂的缺乏,而不是过量。” 多年以来,医生们一直告诉 2 型糖尿病初期的患者(血糖水平高的人)多锻炼身体,之后才开始对他们进行降血糖药物(例如 Metformin)治疗。在 Watson 看来,锻炼正是解答谜题的关键,那么锻炼对于高血糖的人们有何好处呢?他推测,氧化还原反应的化学过程蕴含了重要的线索。机体细胞要生存,就必须正确合成氧化剂和抗氧化剂。Watson 观察到了“二者之间存在着一个微妙的平衡。” 体育锻炼促使机体生成大量的氧化剂,即被称为活性氧 ROS 的分子。在内质网 ER 中,过氧化氢作为一种活性氧可以帮助形成稳定蛋白折叠的化学键(二硫键)。 Watson 指出,当内质网中的氧化反应不足时,就会出现无法行使功能的未折叠蛋白。他认为,这引起了损害胰腺的炎症,进而导致 2 型糖尿病。因此,促进氧化作用的锻炼,可以对高血糖患者产生有益的影响。如果个体使用大量的抗氧化剂,就会减少甚至抵消锻炼带来的益处。类似的情况还有,服用大量抗氧化剂补品会影响运动员的训练效果。Watson 提出的两个关键信息是:“第一点,我们非常需要深入研究锻炼有益健康的具体机制,” Watson 计划今年晚些时候在冷泉港实验室举行一次学术会议,希望到时发布一个更大的科研成果。
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